1、朱一品（陈赫饰演）：智慧幽默的医馆学徒，在医馆馆主离奇失踪之后收到一个卷轴，他快速阅读并记下了卷轴的内容，然后昏倒，卷轴毁灭。从此卷入离奇的案件。
2、杨宇轩（王传君饰演）：高大英俊的东厂高手，白发剑眉，擅长使用长剑，奉命到医馆调查卷轴的事情。陈安安喜欢杨宇轩，但被前女友聂紫衣吃醋，一个男人两个女人又纠缠不清。
3、柳若馨（姜妍饰演）：面貌俊俏的西厂高手，卧底医馆查案。看似漂亮但心机颇重，深得医馆朱一品跟赵布祝的喜欢，在离奇的案件之中分辨黑白，也渐渐喜欢上朱一品。
4、陈安安（张子萱饰演）：医馆的小徒弟，活泼单纯也漂亮，很喜欢馆里的朱一品，自从杨宇轩来到馆中，有意无意多多接触杨宇轩，以引起朱一品的注意，却惹来杨宇轩前女友的仇视。
5、赵布祝（佟磊饰演)：猥琐医生
6、庄田田（张艺骞饰演）:豆腐店老板
7、五百年前的大明京城，一家小医馆里生活着一群乐呵的年轻人。一天，医馆馆主离奇失踪，徒弟朱一品随后收到一个卷轴，无意中打开后，天生的神速记忆让他快速阅读并记下了卷轴的内容，之后就晕厥过去，卷轴也随之烧成灰烬。东厂西厂得知后，派麾下高手杨宇轩与柳若馨前来医馆卧底查探卷轴里的秘密，阴差阳错，他们和朱一品卷入一个个离奇案件。新人入局，也打破了医馆往日的平静。柳若馨年轻貌美，杨宇轩高大英俊，朱一品、赵布祝似乎都被柳姑娘所吸引，陈安安故意要跟杨宇轩亲密互动，期间杨宇轩的前女友、锦衣卫副千户聂紫衣也进来搅局，无数种可能都在小小的医馆里悄悄发酵。朱一品带领的医馆神探小分队踏上冒险之旅，披荆斩棘，将一桩桩迷案及其背后的惊天秘密一一揭开。
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