干热灭菌法是在干燥环境下用高温杀死细菌和细菌芽胞的技术。用于不能耐受湿热蒸气、不能用高压蒸汽灭菌的物品，如必须保持干燥的化学物品，有刃器械如刀、剪之类，无水的油剂、油膏、甘油等。干热灭菌法所需温度较高，时间较长。常用温度是160摄氏度，持续2小时。干热最适用于玻璃器皿的灭菌，尤其是玻璃注射器等。温度可以提高到170摄氏度，灭菌时间1小时。干热对某些不耐热材料有较大损害，不宜应用。
