硝酸甘油的作用较多，属于血管平滑肌松弛药物。如果血管平滑肌存在于静脉系统，则硝酸甘油可以舒张静脉系统，减少心脏回心血量，减轻心脏负担，从而缓解心脏做功。如果硝酸甘油扩张动脉血管，会减少心脏泵出血液的压力，也会减少心脏做功。
以上两点用于纠正心力衰竭，硝酸甘油起到缓解心脏压力作用。硝酸甘油还有一个非常重要的作用，就是扩张冠状动脉血管，对于冠状动脉狭窄，也就是心绞痛患者服用硝酸甘油，可以扩张冠状动脉血管，从而减轻心肌缺血的表现，缓解心绞痛症状。
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