对骨质疏松性骨折愈合的影响？

骨质疏松性骨折的治疗是目前骨科的难题之一，因为骨折部位骨的骨量降低，强度变弱，复位及牢固的内固定十分困难，人工材料的植入也易发生松脱而导致失败，而且骨痂愈合的质量相对较差，所以骨折再发生率极高。因此，针对骨质疏松骨折的治疗除了外科治疗手段外，对原发病骨质疏松症同时进行处理，有利于提高骨折愈合率。PTH是调节钙、磷代谢、维持机体钙平衡的最为重要的肽类激素之一。rhPTH1-34有着与全分子PTH一样的与受体结合的能力及生物活性，而且比全分子PTH具有更少的副作用，被广泛用于研究PTH的结构与功能。虽然现在许多动物和临床研究提示PTH是提高骨量、改善骨质量、治疗骨质疏松症的新方法，但在使用PTH治疗骨质疏松性骨折时，能否既提高骨密度，又能改善骨的生物力学性能，促进骨折的愈合，减少再次骨折发生率，是值得探讨的课题。

一、材料与方法

1、骨质疏松骨折模型的建立

选择6月龄，体重260～300g，雌性，清洁级SD大鼠80只,随机分为rhPTH1-34组、雌激素组、对照组和假手术组，每组20只。前3组在10％水合氯醛（0.3g/kg）腹腔注射麻醉下，行双侧卵巢切除术，假手术组暴露卵巢而不切除，缝合切口。饲养3个月后，在同样麻醉下建立骨折模型，即用钢丝线锯锯断右侧股骨中段，行克氏针（直径2mm）髓腔逆行内固定。两次手术过程均在严格无菌条件下进行，术后使用青霉素（200万μ/kg）预防感染，共三日，术后动物放至笼中自由活动与进食。

2、用药方法和标本的收集及处理

从骨折实验模型建立后第一天起，rhPTH1-34组皮下注射rhPTH1-34，三次/周，20μg/kg；雌激素组皮下注射苯甲酸雌二醇，三次/周，0.1mg/kg；对照组和假手术组皮下注射等量生理盐水，三次/周。

采用过量麻醉的方法，于骨折内固定术后8周每组各处死2只大鼠，完整取出右侧股骨，剔除软组织，生理盐水冲洗，立即置入10％中性甲醛（福尔马林）溶液中，固定24小时，分组标记，行骨痂的组织学检查。大鼠右侧股骨骨折内固定术后用药治疗9周之后，采用过量麻醉的方法处死大鼠，分别取出右侧股骨及腰3椎体，剔除附着于骨上的软组织，取出内固定，用浸透生理盐水的纱布包裹后放入塑料袋中，分组标记，置于-20℃冰箱中保存，准备行三点弯曲实验及腰3椎体凹入实验。行以下测定或检查：

骨密度的测定：每组选定10只大鼠，活体下分次测定去卵巢前，去卵巢后12周第4、5腰椎椎体以及右侧股骨骨折处BMD值药物治疗后9周，活体下使用骨密度仪测定第4、5腰椎椎体BMD值，处死大鼠后完整取出右股骨，剔除软组织，取出内固定克氏针，测定右侧股骨骨折处BMD值。

摄X线片检查：将预先标记的大鼠，分别于骨折内固定术后4、8周行右股骨X线片检查，对比观察各组骨痂生长的情况。

骨折处骨痂组织病理学检查：于骨折内固定术后8周每组各处死2只大鼠，取骨折处骨痂行组织病理学观察，比较各组的骨折愈合情况。

生物力学测定：治疗9周后处死大鼠，取右侧股骨及腰3椎体，采用MTS-858生物材料实验仪分别行股骨三点弯曲实验及腰椎椎体凹入实验。

3、统计学处理：使用SPSS11.0统计软件进行统计分析，结果用±s表示，同一时段4组均数比较采用单因素方差分析，P0.05差异有显著性。

二、结果

1、放射学检测

骨折内固定术后4、8周X线片对比观察发现，rhPTH1-34组可见连续性骨痂通过骨折线，骨折线周围有骨痂包裹，骨折线模糊，同时期的雌激素组、对照组、假手术组仅见少许反应性骨痂，骨折线周围无骨痂包裹，骨折线清晰。

2、骨痂的组织学检查

在第8周可见软骨性骨痂逐渐被骨性骨痂取代，其中rhPTH1－34组的骨小梁较粗且致密，排列与应力方向一致，骨化良好，软骨性骨痂改建为骨性骨痂。对照组仍可见较多软骨性骨痂，向骨性骨痂转化缓慢，软骨细胞较多，骨小梁较细，间隙较大，结构紊乱，疏松。

3、骨密度的测定

治疗前(卵巢切除术后3个月)，rhPTH1-34组、雌激素组及对照组大鼠的腰4、5椎和右侧股骨BMD值较假手术组明显降低，有显著性差异（P0.05），提示OVX大鼠在双侧卵巢切除术后3个月时出现明显的骨质疏松，显示造模成功(见表1)。rhPTH1-34组和雌激素组经皮下注射rhPTH1-34 9周后右侧股骨BMD值明显高于对照组, 有显著性差异(P0.05)。 假手术组右侧股骨BMD值明显高于对照组, 有显著性差异(P0.05)。rhPTH1-34组、雌激素组及假手术组的右侧股骨BMD值无显著性差异。