利福平是抗结核治疗中的核心杀菌药，主要用于肺结核、结核性胸膜炎、结核性脑膜炎、骨结核等由结核分枝杆菌引起的感染。成人利福平的用量是每天一次，每次450-600mg，也就是3-4片，早晨空腹一次服用。体重小于50kg的成年人每天450mg；体重大于50kg的成年人每天600mg。儿童的剂量根据体重计算，每天一次，每次每公斤体重10-20mg，也是早晨空腹一次顿服。利福平还用于其他感染，比如脑膜炎奈瑟菌的携带者，每次每公斤体重5mg，每隔12个小时一次。
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