75%的医用酒精可用来进行皮肤、手、物品以及精密医疗仪器的消毒。使用时可以直接喷洒在这些物品上，比如手的消毒，可将75%的医用酒精直接喷洒在手上，作用时间为1-2分钟左右。若进行某些医疗操作，喷洒次数可能需2次以上，作用时间相对较长，3-5分钟左右才能达到较好的消毒效果。
医用仪器的消毒，如体温计消毒，需泡在75%的酒精里5分钟以上。酒精消毒不适合大面积喷洒，以及大环境消毒，如房间、厕所、公共场所的消毒，使用医用酒精消毒时需要远离明火和高温电器。
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