窄谱中波紫外线及其联合中药对H2O2致豚鼠脱色作用的影响

王力军1 闵仲生2 王子雄1

摘要：将30只豚鼠随机分为模型组，NB-UVB组及NB-UVB联合白驳丸及白癜丸组（联合组）。各组豚鼠每日以H2O2脱色，模型组不加治疗；NB-UVB组豚鼠光疗5次/周；联合组除光疗同NB-UVB组外每日服白驳丸及白癜丸。实验结束后比较靶皮损颜色变化，并取靶皮损中脱色最明显部位皮损用硫酸亚铁Lillie法进行染色，观察并计算其中有黑色素毛囊数。结果：模型组与NB-UVB组，联合组相比有明显的脱色，而NB-UVB组与联合组相比则无显著差别；NB-UVB组，联合组靶皮损内有黑素毛囊数均显著少于模型组，但两者之间无显著差别。无锡市中医院皮肤科王力军

白癜风的治疗较为棘手,临床常采用不同的方法联合治疗。窄谱中波紫外线（NB-UVB）已经应用于白癜风的治疗并取得了较为满意的疗效，但是其与中药联合应用是否有协同作用尚不得而知。我们做了相关实验研究，现将结果报告如下。

1.材料与方法：

1.1受试动物 普通级健康黑色或褐色豚鼠30只，根据性别，体重及靶皮损颜色随机分为模型组9例，NB-UVB组11例，NB-UVB联合白驳丸及白癜丸组（联合组）10例。

1.2药品、试剂及器械 白驳丸（紫草、降香、草河车、白药子、白薇、桃花、红花、苍术、龙胆草、海鳔鞘、甘草、生首乌、刺蒺藜 批号：031021），白癜丸（白蒺藜、紫背浮萍、苍耳子、白蓼花 批号：031028）由江苏省中医院制剂室提供;3% H2O2由南京兴蓝箭科技公司提供（批号：03.09.1―1）; UV236 B型光疗仪（德国沃曼公司生产,波长310-315nm，峰值311nm）。

3实验方法 各组豚鼠每日以3% H2O2于靶皮损区域涂擦2min，每周以10%硫化钠脱毛一次。NB-UVB组豚鼠光疗5次/周，起始剂量0.3J/cm²，每次增加0.1J/M²直至1.0J/M²，然后每次增加0.2J/cm²至2.0J/M²，随后以3.0J/M²辐照至实验结束。联合组除光疗同NB-UVB组外每日服4倍成人剂量的白驳丸及白癜丸（白驳丸0.70g/kg.d，白癜丸0.70g/kg.d）。比较实验前后靶皮损颜色变化，实验结束后取靶皮损中脱色最明显部位1×1M2大小皮损用中性甲醛固定,石蜡包埋, -----------------------------------------------------

作者单位：1：南京中医药大学附属无锡医院，无锡市中医医院 214001

2：南京中医药大学附属医院，江苏省中医院

切片,用硫酸亚铁lillie法1进行黑色素染色,观察并计算其中有黑色素毛囊

数。（病理切片由江苏省中医院病理科协助完成）

1. 4观察指标

1.4.1肉眼观察指标及积分：靶皮损颜色无变化（0分）；2靶皮损出现小片色素减退（1分）；3靶皮损出现较多色素减退（2分）；4靶皮损出现小片脱色斑或少量毛发变白（3分）；5靶皮损出现大片脱色斑或较多毛发变白（4分）。

1.4.2组织病理指标：顺序观察20个毛囊,计算其中有黑色素毛囊数.

2.实验结果

经过30次光疗各组豚鼠照射累积剂量达64.2J/只。NB-UVB组和联合组豚鼠靶皮损区域均可以见到色素明显加深，但同时仍可见到部分豚鼠靶皮损区域有色素减退，色素脱失及部分毛发变白。模型组豚鼠靶皮损区域有更显著的色素减退，色素脱失及部分毛发变白。实验结束后各组靶皮损脱色积分如下:模型组3.333±0.816；NB-UVB组1.000±1.500；联合组1.125±1.555。各组间皮损脱色积分比较见附表1。

表1 各组间靶皮损脱色积分比较

两均数差

q值

P=0.05

模型组与联合组

2.333

3.727

3.580*

模型组与NB-UVB组

2.208

3.615

2.950*

NB-UVB组与联合组

0.125

0.222

2.950

* P＜0.05

实验结束后各组均可见部分毛囊被脱色，模型组靶皮损有黑素毛囊数平均为8.500±3.082个，NB-UVB组14.444±3.395个，联合组15.375±2.615个。各组靶皮损有黑素毛囊数比较见附表2

表2 各组靶皮损有黑素毛囊数比较

两均数差

q值

P=0.05

模型组与联合组

5.944

9.886

2.950*

模型组与NB-UVB组

6.875

10.287

3.580*

NB-UVB组与联合组

0.931

1.427

2.950

* P＜0.05

结果表明无论靶皮损颜色改变情况还是有黑素毛囊数都提示NB-UVB及NB-UVB联合中药白驳丸、白癜丸对H2O2的脱色均有一定的抑制作用，但两者对H2O2脱色的抑制作用无明显差别。

3.讨论

窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗白癜风的机理至今尚不十分清楚，可能主要是两方面因素的作用:1, NB-UVB照射皮肤，通过刺激表皮细胞分泌多种细胞因子包括ＩＬ-1、肿瘤坏死因子-α、白三烯等刺激毛囊外毛根鞘多巴胺阴性的无色素黑素细胞增殖、产生黑素并移行到色素脱失部位致色素恢复；2. NB-UVB的免疫抑制作用使移行及增殖的黑素细胞免遭破坏。中医认为白癜风主要由气血不和，肝肾不足，瘀血阻滞所致，并且气血不和在发病机制中占有相对重要的位置,中药白驳丸（紫草、降香、草河车、白药子、白薇、桃仁、红花、苍术、龙胆草、海鳔鞘、甘草、生首乌、刺蒺藜），白癜丸（白蒺藜、紫背浮萍、苍耳子、白蓼花）分别以和血散风为主兼补肝肾，两药协同共治疗白癜风在江苏省中医院的应用已有近20年的时间，取得了较为满意的疗效。尽管NB-UVB治疗白癜风因其较好的疗效和较少而轻微的副反应已经得到越来越广泛的应用，但是就总体疗效而言尚有待于进一步的提高。龙子江等3以H2O2外用,使豚鼠黑色皮肤脱色,建立白癜风动物模型，结果显示用H2O2后肉眼可见豚鼠黑色皮肤变苍白,随用药时间延长,有的出现白斑,甚至原有黑毛处长出白毛。皮肤病理切片可见,棘层和毛囊内黑色素减少。在我们的实验中各组同样出现了不同程度的类似变化，模型组的脱色明显强于NB-UVB组、联合组，统计学处理有显著差异，而后两者之间无显著性差异。实验结果显示单纯NB-UVB光疗和NB-UVB光疗联合中药白驳丸，白癜丸内服均能明显抑制H2O2的脱色作用，但两者程度上没有显著性差异。尽管如此，为进一步提高疗效今后仍将不得不尝试各种不同方法的联合应用。

参考文献

1.龚志锦，詹熔洲 病理组织制片和染色技术，上海：上海科学技术出版社，1994：184

2.龙子江，白玫，樊彦. 化学脱色法制备白癜风动物模型，安徽中医学院学报，1997，16（6）：60-61.