一般的眼药水一天滴3-4次，分别早、中、晚及睡觉前滴眼。但是需要根据不同的药物及病情的严重程度不同，采取不同的滴眼频率。例如急性感染性结膜炎、角膜炎时滴抗生素眼药水可以1-2小时滴一次，病情好转后，一天3-4次。许多抗青光眼眼药水每天一次或者两次就可以，闭角型青光眼急性发作时，急救性治疗时毛果芸香碱需要五分钟一次滴眼。由于一滴眼药水可以达到30-50µl，而结膜囊容量最多为10µl，一次一滴就足够了。为了促进药物的吸收，又不浪费，滴两种眼药水时至少间隔5-10分钟。
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