椎管穿刺首先是经过皮肤、皮下组织，然后到深筋膜，突破深筋膜后就到达了棘上韧带、棘间韧带、黄韧带，突破黄韧带后就进入了椎管。再继续进入会到达硬膜外，突破硬膜可以达到蛛网膜下腔。
当达到蛛网膜下腔后就会有脑脊液流出，这个时候会可以收集脑脊液，进行脑脊液的化验。椎管穿刺后要去枕平卧6小时，这样可以防止低压性头痛。
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