C肽试验的做法有两种：第一、对于初诊糖尿病患者进行胰岛功能检查时，可以喝标准75g葡萄糖进行C肽释放试验检查，空腹抽血测C肽，喝糖水后1小时再抽一次血，2小时再抽一次血，通过结果对胰岛功能进行判断。第二、对于住院确诊糖尿病患者复查胰岛功能，一般临床上会采用一种简化的方案，就是早晨吃2两馒头餐，进行相应C肽释放试验的检查。C肽释放试验和胰岛素释放试验不同在于C肽释放试验不受外源性胰岛素的影响，也就是如果口服了磺脲类药物或者打胰岛素不能做胰岛素释放试验，只能做C肽释放试验对胰岛功能进行判断。
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