腰椎穿刺成败的关键是摆取合适的体位，还有确定穿刺部位。腰部穿刺的穿刺部位确定是沿双侧髂嵴最高点做一个连线，双侧髂嵴最高点连线与脊柱中线相交处为第4腰椎棘突，然后选择第4-5腰椎间隙进针。如果第4-5腰椎间隙进针失败，则可选择第3-4腰椎间隙，或者第5腰椎与骶股间隙。
腰椎穿刺时需摆取合适的体位，通常是左侧卧位，屈颈抱膝，尽量使脊柱前屈，以拉开椎间隙距离，背部要和检查的床面垂直，脊柱与床面平行。
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