25-羟维生素D3不叫正常的指标，而叫充足或合适的水平，应该在75-375nmol/L。维生素D3是维生素D的前体，虽然叫维生素D，但是实际上是一种激素，叫D激素，和钙、磷以及骨骼的健康密切相关。阳光的紫外线照射到皮肤，皮肤用胆固醇做为原料合成维生素D，维生素D再进行进一步的转化包括25-羟维生素D，另外1，25-双羟维生素D最后形成了有活性的维生素D，帮助钙的吸收。
由于25-羟维生素D在血里面半衰期比较长，浓度相对稳定，因此测定-25羟维生素D反映机体维生素D的营养状态，虽然对于理想的25-羟维生素D水平，检测结果没有达成共识，但是多数的建议25-羟维生素D如果低于50nmol/L，也就是小于20ng/mL，考虑维生素D缺乏。如果在50-75nmol/L，考虑维生素D相对缺乏，也就是处于临界的状态，相对合适的水平应该在75-375nmol/L。同时要强调如果高于375nmol/L，要考虑维生素D中毒。
维生素D、25-羟维生素D的测定主要帮助诊断像维生素的缺乏在儿童出现的佝偻病，在成人出现的骨软化，另外对于骨质疏松的诊断和治疗有一定的帮助。维生素D通过测定以后可以反映维生素D的营养状况，维生素D的补充最主要的是通过多晒太阳，皮肤帮助合成维生素D，这是补充维生素D最好的方法。维生素D目前除了跟骨骼、健康有密切相关的经典作用，也存在着所谓非经典作用，包括肿瘤、心血管疾病、糖尿病，因此现在越来越关注25-羟维生素D测定的结果反映维生素D的营养状态。
