甲氨蝶呤具有广谱抗肿瘤活性，可以单独应用或者与其他的化疗药物联合使用。一般可以用于乳腺癌、绒毛膜癌、恶性葡萄胎、白血病以及银屑病等治疗。使用方法根据病情的不同，也有所不同，比如绒毛膜癌，常规剂量是15-30mg/日，肌注5天，通常需要3-5个疗程。其他的乳腺癌一般是40mg/平方米，在第1天和第8天静脉给药。如果是白血病，每天的口服剂量是3.3mg/平方米，还要联合强的松口服。其他的像大剂量的化疗，可能剂量更高，需要具备充分的设备以及条件，由专家执行治疗方案。银屑病的化疗一般是15-25mg，每周肌注或者静注1次，对于相对比较严重，难以控制的银屑病可能有效。
